產(chǎn)品名稱:蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品型號:PC0010
產(chǎn)品特點(diǎn):蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒貨號:PC0010規(guī)格:2500T保存:開封使用后請密封保存,本試劑盒自訂購之日起九個月內(nèi)有效。
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蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
貨號:PC0010
規(guī)格:2500T
保存:開封使用后請密封保存,本試劑盒自訂購之日起九個月內(nèi)有效。
產(chǎn)品內(nèi)容:
組成 | 包裝(2500 微孔) | 保存 |
5×G250 染色液 | 100ml | 2-8℃ |
PBS 稀釋液 | 30ml | 2-8℃ |
蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
產(chǎn)品簡介:
考馬斯亮蘭 G-250 染料,在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合,使染料的大吸收峰的位置(Imax),由 465nm 變?yōu)?595nm,在一定的濃度范圍內(nèi),測定的吸光度值 A595 與蛋白質(zhì)濃度成正比。Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá) 1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá) 5mM,但受略高濃度的去垢劑影響,需確保 SDS 的濃度低于 0.1%,Triton X-100 低于 0.1%,Tween 20, 60, 80 低于 0.06%。
含去垢劑的樣品推薦使用索萊寶生產(chǎn)的 BCA 蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明:
一.微孔酶標(biāo)儀法
1. *溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取 10ul,稀釋 250ul ,使終濃度為 0.2mg/ml。待測蛋白樣品在什么溶液中,標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻, 取 1ml 5×G250 染色液, 加入 4ml 雙蒸水, 混勻成 1×G250染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
3. 將標(biāo)準(zhǔn)品按 0,2,4,6,8,12,16,20 微升分別加到 96 孔板中,加 PBS 稀釋液補(bǔ)足到 20 微升。
4. 將樣品作適當(dāng)稀釋(好多做幾個梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋),加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線 1/2 后。
5. 各孔加入 200 微升稀釋后的 1×G250 染色液,室溫放置 3-5 分鐘。
6. 用酶標(biāo)儀測定 A595,或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度。
7. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中的蛋白濃度。
二.分光光度計法
如無酶標(biāo)儀,染色反應(yīng)可在離心管中進(jìn)行,反應(yīng)液混勻后加入比色皿中,使用分光光度計測定吸光值。
步驟如下:
1. 取八支(或者更多)干凈的 10ml 離心管,標(biāo)記上號。
2. 取 100ulBSA 加入 PBS 2.4ml 稀釋終濃度為 0.2mg/ml。
3. 5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻,取 10ml 5×G250 染色液,加入 40ml 雙蒸水,混勻成 1×G250 染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
4. 按下表加入試劑(以每孔 5ml 計,多余的用來清洗比色皿)
5. 反應(yīng) 3 分鐘后測 OD 值。為了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,可每間隔 2 分鐘加一管染色液,每間隔 2 分鐘測一管 OD值。如下表:
相關(guān)產(chǎn)品:
PC0001 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品( 5mg/ml )
PC0015 5×G250( 蛋白定量用 )
PC0021 BCA 試劑
PC0030 Lowry 法蛋白濃度測定試劑盒
PC0020 BCA 法蛋白濃度測定試劑盒
R0010 高效 RIPA 組織 / 細(xì)胞快速裂解液
PR1600 預(yù)染低分子量蛋白 MARKER
R0050 核蛋白抽提試劑盒
蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
參考文獻(xiàn):
《Cetuximab and Doxorubicin loaded dextran-coated Fe3O4 magnetic nanoparticles as novel targeted nanocarriers for non-small cell lung cancer》 作者:Qinlu Zhang,Qian Liu,Menghan Du,Yali Cui,Lixia Zhang,Lili Guo,Le Ma,Mingwei Chen, 期刊:Journal of Magnetism and Magnetic Materials 影響因子:3.046 PMID:
《The critical roles of exposed surface residues for the thermostability and halotolerance of a novel GH11 xylanase from the metagenomic library of a saline-alkaline soil》 作者:Zhongyuan,Li,Xiumei Li,Tianhui Liu,Shiheng Chen,Huihui Liu,Hui Wang,Kun Li,Yajian Song,Xuegang Luo,Junqi Zhao,Tongcun Zhang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30986455
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