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產(chǎn)品名稱:多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC0195

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)

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BC0195多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱:多酚氧化酶測(cè)定試劑盒 (微量法)
產(chǎn)品英文名:Micro Polyphenol Oxidase (PPO) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào):BC0195                          產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U8三樓
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣                   產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4保存或-20保存;            參考價(jià)格:1000
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:多酚氧化酶測(cè)定試劑盒|微量法|

簡要介紹:
PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。
PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

產(chǎn)品詳細(xì)描述

商品貨號(hào):商品品牌:規(guī)格基本售價(jià):選擇規(guī)格
BC0195-100管/48樣Solarbio 100管/48樣 1000.00元


產(chǎn)品簡介: 
PPO 主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元 酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。 PPO 能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在 410nm 有特征光吸收。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑: 
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研 缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容: 
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,用前混勻即可;
試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。

操作步驟:  
一、粗酶液提?。?/span> 
1、收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲 波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10 分鐘,取 上清,置冰上待測(cè)。
2、稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10 分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。

二、測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長 410nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測(cè)定(在 EP 管中依次加入下列試劑)  

試劑名稱(μl)測(cè)定管對(duì)照管
試劑一200200
試劑二5050
樣本50 
煮沸的樣本 50
37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)中準(zhǔn)確水浴 10min 后,迅速放入沸水中加熱 10min

充分混勻,5000g,常溫離心 10min,收集上清,取 200μL 微量玻璃比色皿或 96 孔板中,410nm 處檢測(cè)測(cè)定管和對(duì)照管吸光度,計(jì)算ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照。

PPO活性計(jì)算:  
a.用微量玻璃比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下 
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè) 酶活力單位。
PPO(U/mgprot)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A 測(cè) 定-A 對(duì)照)÷蛋白濃度(mg/mL)=200×ΔA÷蛋白濃度(mg/mL) 此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 g 組織在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力 單位。
PPO(U/g 鮮重)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A 測(cè) 定-A 對(duì)照)÷樣本鮮重(g/mL)=200×ΔA÷樣本鮮重(g/mL)
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為 一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/104 cell)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A 測(cè) 定-A 對(duì)照)÷500=0.4×ΔA

b.用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.005 定義為一個(gè) 酶活力單位。
PPO(U/mgprot)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.005×(A 測(cè)定-A 對(duì)照)÷蛋白濃度(mg/mL)=400×ΔA÷蛋白濃度(mg/mL) 此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。
(2)按樣本鮮重計(jì)算: 
單位的定義:每分鐘每 g 組織在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.005 定義為一個(gè) 酶活力單位。
PPO(U/g 鮮重)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.005×(A 測(cè)定-A 對(duì)照)÷樣本鮮重(g/mL)=400×ΔA÷樣本鮮重(g/mL)
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.005 定義為 一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/104 cell)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.005×(A 測(cè)定-A 對(duì)照)÷500=0.8×ΔA

注意事項(xiàng): 
不同樣本的多酚氧化酶的反應(yīng)溫度略有差別,可在 25-37℃之間進(jìn)行調(diào)節(jié)。

相關(guān)文獻(xiàn):
《Effectof L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
《MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway》 作者:B Li, Y Ding, X Tang, G Wang, S Wu, X Li 期刊:Journal of Receptor and Signal Transduction Research. 影響因子:2.998 PMID:30396299

多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)試劑盒

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